细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

胞培养操作规程： 
主要功能：
（1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
（2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。
（3）与血管疾病的进展和稳定有关。
变化：
（1）主动脉硬化。
（2）主动脉瘤
（3）主动脉钙化。
基本特性：
（1）组织来源于正常大鼠大动脉组织。
（2）鉴定：肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
（3）原代细胞培养末期液氮冻存。
（4）每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。
（5）肌动蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

实验报告
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。

大鼠乙酰胆碱(Ach)ELISA检测试剂盒Ratacetylcholine,ACH 96T/48T 苯甲酰芍药苷(标准品)  benzoylpaeoniflorin   质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠乙酰胆碱(Ach)免疫试剂盒 Rat acetylcholine,ACH ELISA Kit 3,4,5-三咖啡酰奎宁酸(标准品)  3,4,5-Tricaffeoylquinic acid  质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA检测试剂盒Ratacetylcholinereceptoraibody,AChRab 96T/48T 泽泻醇A醋酸酯  Alisol A 24-acetate  质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)免疫试剂盒 Rat acetylcholine receptor aibody,AChRab ELISA Kit 泽泻醇C-23-醋酸酯;泽泻醇C单乙酸酯  Alisol C monoacetate   质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)免疫试剂盒 Rat Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit 香紫苏内酯(标准品)  Sclareolide  质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠乙酰辅酶A 免疫试剂盒 Rat acetyl-CoA ELISA Kit 香紫苏内酯  Sclareolide  质量规格：GC≥98%,BR

大鼠乙酰辅酶A羧化酶合成酶(ACC)免疫试剂盒 Rat Acetyl-CoA Carboxylase Syhetase,ACC ELISA Kit 桃叶珊瑚苷  Aucubin  质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠异柠檬酸脱氢酶(ICD)免疫试剂盒 Rat isociate dehydrogenase,ICD ELISA Kit 甲硝唑  Metronidazole  质量规格：>99%,BR

大鼠抑瘤素M(OSM)免疫试剂盒 Rat oncostatin M,OSM ELISA kit 甲硝唑(标准品)  Metronidazole  质量规格：HPLC>99%,标准品

大鼠抑瘤素M受体(OSMR)免疫试剂盒 Rat Oncostatin-M-specific receptor subunit beta,OSMR ELISA kit 乙酰哈巴苷  8-O-Acetylharpagide  质量规格：HPLC≥95%，标准品
酵母铜ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量检测试剂盒20 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷,缩减二钾盐  β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced dipotassium salt  质量规格：美国进口

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香紫苏内酯  Sclareolide  质量规格：GC≥98%,BR 大鼠乙酰辅酶A 免疫试剂盒 Rat acetyl-CoA ELISA Kit

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