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C26-RFP荧光标记细胞株价格

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更新时间:2022-08-05

有效日期:还剩106

产品详情

C26-RFP荧光标记细胞株价格胞培养操作规程:
主要功能:
1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
2)表达钙通道及ICAM-1VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
3)与血管疾病的进展和稳定有关。
变化:
1)主动脉硬化。
2)主动脉瘤
3)主动脉钙化。
基本特性:
1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMADesmin免疫荧光染色。
3)原代细胞培养末期液氮冻存。
4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml
5)肌动蛋白,alpha-SMADesmin免疫荧光染色验证。
6)不含有HIV-1 HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

实验报告
一、分离与培养:
   1、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
   3、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
   1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
   2PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
   3PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗(Abbioscience公司),然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
   5PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗(嘉美生物公司), 37条件下放置1h
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。

产品名称

C26-RFP荧光标记细胞株价格

英文名称

C26-RFP

价格

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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。



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